[giaban]0.000 VNĐ[/giaban]
[kythuat]
[/kythuat]
[tomtat]
[tomtat]
Nghiên
cứu thiết kế vectơ pB2GW7 mang gen cryIA(c) và đánh giá khả năng chuyển gen
trên cây Arabidopsis thaliana
MỤC
LỤC
MỞ
ĐẦU
1.
Đặt vấn đề
2.
Mục tiêu nghiên cứu
3.
Nội dung nghiên cứu
CHƯƠNG
1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1.
Vi khuẩn A. tumefaciens và quá trình chuyển gen vào cây trồng
1.1.1.
Đặc điểm vi khuẩn A. tumefaciens
1.1.2.
Cấu trúc và chức năng của Ti-plasmid
1.1.3.
Cơ chế quá trình chuyển gen nhờ A. tumefaciens
1.1.4.
Một số hệ thống chuyển gen thông qua vi khuẩn A. tumefaciens
1.2.
Vector chuyển gen dựa trên Ti-plasmid
1.3.
Các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả chuyển gen thông qua vi khuẩn A. tumefaciens
1.4.
Công nghệ Gateway và vector sử dụng trong đề tài
1.4.1.
Công nghệ Gateway
1.4.2.
Vector nhân dòng pENTRTMD/TOPO cloning
1.4.3.
Vector chuyển gen pB2GW7
1.5.
Vi khuẩn B. thuringiensis và gen cry
1.5.1.
Những nghiên cứu chung về vi khuẩn B. thuringiensis
1.5.2.
Những nghiên cứu về gen cry
1.5.3.
Những nghiên cứu về gen cry1A
1.6.
Tình hình nghiên cứu chuyển gen vào cây A. thaliana
1.6.1.
Đặc điểm nông sinh học cây A. thaliana
1.6.2.
Những nghiên cứu về cây A. thaliana
CHƯƠNG
2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1.
Vật liệu, hóa chất và thiết bị
2.1.1.
Vật liêu nghiên cứu
2.1.2.
Hóa chất sử dụng trong đề tài
2.1.3.
Thiết bị sử dụng trong đề tài
2.2.
Phương pháp nghiên cứu
2.2.1.
Nhân dòng gen cryIA(c) từ vector OB-Mutant#16-cryIA(c)
2.2.1.1.
Nhân gen cryIA(c) từ vector OB-Mut-cryIA(c)
2.2.1.2.
Gắn gen cryIA(c) lên vector tách dòng pENTR™/D-TOPO®
2.2.1.3.
PCR kiểm tra các dòng khuẩn lạc thu được sau nhân dòng với cặp mồi đặc hiệu của
gen cryIA(c)
2.2.1.4.
Xác định trình tự đoạn ADN được nhân dòng
2.2.2.
Tạo chủng vi khuẩn A. tumefacien mang vector pB2GW7-cryIA(c)
2.2.2.1.
Gắn gen cryIA(c) lên vector chuyển gen pB2GW7
2.2.2.2.
Phân tích các dòng tế bào E. coli thu được sau chọn lọc
2.2.2.3.
Biến nạp vector pB2GW7- cryIA(c) vào tế bào vi khuẩn A. tumefacicen
2.2.2.4.
PCR kiểm tra các dòng khuẩn lạc A. tumefaciens thu được sau biến nạp với cặp
mồi đặc hiệu của gen cryIA(c)
2.2.3.
Đánh giá khả năng chuyển gen của hệ thống vector pB2GW7-cryIA(c) trên cây A.
thaliana
2.2.3.1.
Tạo cây A. thaliana chuyển gen
2.2.3.2.
Đánh giá cây A. thaliana chuyển gen dựa trên khả năng kháng thuốc diệt cỏ
2.2.3.3.
Đánh giá cây A. thaliana chuyển gen dựa trên phản ứng PCR với cặp mồi đặc hiệu
của gen bar
2.2.3.4
Đánh giá cây A. thaliana chuyển gen dựa trên phản ứng PCR với cặp mồi đặc hiệu
của gen cryIA(c)
2.2.3.5.
Đánh giá khả năng sinh trưởng của cây A. thaliana chuyển gen
CHƯƠNG
3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.1.
Kết quả nhân dòng gen cryIA(c) từ vector OB-Mutant#16-cryIA(c)
3.1.1.
Kết quả nhân gen cryIA(c) từ vector OB-Mut-cryIA(c)
3.1.2.
Kết quả gắn gen cryIA(c) lên vector tách dòng pENTR™/D-TOPO®
3.1.3.
Kết quả PCR kiểm tra các dòng khuẩn E. coli thu được với cặp mồi đặc hiệu của
gen cryIA(c)
3.1.4.
Kết quả xác định trình tự đoạn ADN được nhân dòng
3.2.
Kết quả tạo chủng vi khuẩn A. tumefacien mang vector pB2GW7-cryIA(c)
3.2.1.
Kết quả gắn gen cryIA(c) lên vector chuyển gen pB2GW7
3.2.2.
Kết quả phân tích các dòng tế bào E. coli thu được sau chọn lọc
3.2.3.
Kết quả biến nạp vector pB2GW7- cryIA(c) vào tế bào vi khuẩn A. tumefacicen
3.2.4.
Kết quả PCR kiểm tra các dòng khuẩn lạc A. tumefaciens thu được sau biến nạp
với cặp mồi đặc hiệu của gen cryIA(c)
3.3.
Đánh giá khả năng chuyển gen của hệ thống vector pB2GW7-cryIA(c) trên cây A.
thaliana
3.3.1.
Kết quả đánh giá cây A. thaliana chuyển gen dựa trên khả năng kháng thuốc diệt
cỏ
3.3.2.
Kết quả đánh giá cây A. thaliana chuyển gen bằng phản ứng PCR với cặp mồi đặc
hiệu của gen bar
3.3.3.
Kết quả đánh giá cây A. thaliana chuyển gen bằng phản ứng PCR với cặp mồi đặc
hiệu của gen cryIA(c)
3.3.4.
Đánh giá khả năng sinh trưởng của cây A. thaliana chuyển gen
KẾT
LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
TÀI
LIỆU THAM KHẢO
Bài viết liên quan
 và đánh giá khả năng chuyển gen trên cây Arabidopsis thaliana){kind=link}