[giaban]0.000 VNĐ[/giaban]
[kythuat]
[/kythuat]
[tomtat]
[tomtat]
Phát
hiện đoạn Gen Eip18 của chủng Edwardsiella ictaluri ATCC 33202 bằng phương pháp
LAMP (Loop mediated isothermal amplifications)
MỤC
LỤC
MỞ
ĐẦU
CHƯƠNG
1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1
VI KHUẨN Edwardsiella
1.2
BỆNH GAN THẬN MỦ
1.2.1
Tác nhân gây bệnh gan thận mủ
1.2.2
Tình hình bệnh dịch
1.3
CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN E. ictaluri
1.3.1
Phương pháp truyền thống
1.3.2
Phương pháp hiện đại
1.4
PHƯƠNG PHÁP LAMP
CHƯƠNG
2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1
VẬT LIỆU
2.1.1
Chủng vi sinh vật
2.1.2
Hoá chất, enzyme, máy móc
2.1.3
Các loại môi trường
2.1.4
Các dung dịch sử dụng
2.2
PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.1
Tách chiết DNA genome của vi khuẩn
2.2.2
Tách plasmid từ vi khuẩn
2.2.3
Kỹ thuật PCR
2.2.4
Phản ứng nối ghép gen
2.2.5
Biến nạp bằng sốc nhiệt vào E. coli
2.2.6
Chọn lọc các thể biến nạp mang plasmid tái tổ hợp
2.2.7
Cắt DNA plasmid bằng enzyme hạn chế
2.2.8
Tinh sạch sản phẩm DNA plasmid bằng QIAGEN kit
2.2.9
Phương pháp LAMP
2.2.10
Điện di DNA
CHƯƠNG
3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1
Phân lập và xác định trình tự gen eip18 vi khuẩn E. ictaluri ATCC 33202
3.1.1
Phân lập gen eip18 của vi khuẩn E. ictaluri ATCC 33202
3.1.2
Xác định trình tự gen eip18 của vi khuẩn E. ictaluri ATCC 33202
3.1.2.1
Tách dòng gen eip18 bằng vector pJET 1.2/blunt
3.1.2.2
Xác định trình tự gen eip18
3.2
Phương pháp LAMP
3.2.1
Thiết kế mồi cho phản ứng LAMP
3.2.2
Phản ứng LAMP
3.2.3
Tối ưu các điều kiện phản ứng LAMP
3.2.3.1
Ảnh hưởng của nồng độ Mg2+
3.2.3.2
Ảnh hưởng của nồng độ dNTP
3.2.3.3
Ảnh hưởng của tỉ lệ mồi
3.2.3.4
Ảnh hưởng của nồng độ Betaine
3.2.3.5
Ảnh hưởng của nhiệt độ phản ứng
3.2.3.6
Ảnh hưởng của thời gian phản ứng
3.2.3.7
Độ nhạy của phản ứng LAMP
3.2.3.8
Độ đặc hiệu của phản ứng LAMP
3.2.4
Phát hiện phản ứng bằng chỉ thị màu
KẾT
LUẬN
TÀI
LIỆU THAM KHẢO
Bài viết liên quan
){kind=link}