Home
1-luan-an-thac-si
khoa-hoc-tu-nhien-thac-si
Tách dòng và biểu hiện gen pectinase từ vi khuẩn chịu lạnh Pseudoalteromonas haloplanktis ANT 505 trong E. coli và nghiên cứu tính chất của chúng
[giaban]0.000 VNĐ[/giaban]
[kythuat]
[/kythuat]
[tomtat]
[tomtat]
Tách dòng và biểu hiện
gen pectinase từ vi khuẩn chịu lạnh Pseudoalteromonas haloplanktis ANT/505 trong
E. coli và nghiên cứu tính chất của chúng
MỤC LỤC
MỞ ĐẦU
Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. Vi khuẩn ưa lạnh
1.2. Nơi sống của vi khuẩn
ưa lạnh
1.3. Enzyme thích ứng lạnh
1.4. Ứng dụng của enzyme
thích ứng lạnh vào sản xuất công nghiệp
1.5. Pectin và pectinase
1.5.1. Pectin
1.5.2. Pectinase
1.5.2.1. Phân loại pectinase
1.5.2.2. Sự phân cắt cơ chất
pectin bằng pectinase
1.6. Ứng dụng pectinase
trong công nghiệp
1.6.1. Ứng dụng pectinase
trong công nghiệp sản xuất nước ép trái cây
1.6.2. Ứng dụng pectinase
trong công nghiệp dệt may
1.6.3. Ứng dụng pectinase
trong công nghệ sinh học
1.7. Tình hình nghiên cứu
trong và ngoài nước
1.7.1. Tình hình nghiên cứu
trên thế giới
1.7.2. Tình hình nghiên cứu
trong nước
Chương 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG
PHÁP
2.1. Vật liệu, trang thiết bị
và dụng cụ nghiên cứu
2.1.1. Chủng vi khuẩn và
plasmid
2.1.2. Hóa chất, máy móc và
thiết bị
2.2. Địa điểm nghiên cứu
2.3. Phương pháp nghiên cứu
2.3.1. Phương pháp tách DNA
tổng số của chủng vi khuẩn chịu lạnh Pseudoalteromonas haloplanktis ANT/505
2.3.2. Phương pháp điện di
DNA trên gel agarose
2.3.3. Phương pháp PCR khuếch
đại gen
2.3.4. Phương pháp tách dòng
và xác định trình tự gen
2.3.5. Phương pháp giải
trình tự gen
2.3.6. Phương pháp biểu hiện
gen
2.3.7. Phương pháp thu
enzyme ngoại bào, nội bào
2.3.8. Phương pháp thử hoạt
tính enzyme pectinase
2.3.9. Phương pháp điện di
protein trên gel polyacrylamide
Chương 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Kết quả tách chiết DNA
tổng số
3.2. Kết quả khuyếch đại gen
pelC tách chiết từ chủng vi khuẩn Psedoalteromonas haloplanktis ANT/505
3.3. Kết quả tách dòng gen
pelC trong E. Coli
3.4. Kết quả đọc trình tự gen
pelC
3.5. Thiết kế vector biểu hiện
gen pelC
3.5.1. Chuẩn bị vector
pET43b và gen biểu hiện pelC
3.5.2. Phản ứng gắn đoạn gen
pelC vào pET43b và biến nạp vào chủng E. coli BL21
3.5.3. Kiểm tra hoạt tính
pectinase của các thể biến nạp trên môi trường thạch
3.5.4. Kiểm tra sự có mặt
pelC trong các thể biến nạp BL21/pET43pelC
3.6. Biểu hiện enzyme tái tổ
hợp PelC (rPelC) trong môi trường lỏng
3.7. Nghiên cứu một số tính
chất của rPelC
3.7.1. Hoạt tính pectate
lyase của rPelC
3.7.2. Ảnh hưởng của nhiệt độ
và pH tới hoạt tính của enzyme
3.7.3. Ảnh hưởng của ion Ca²+
và Na+ đến hoạt tính pectinase của rPelC
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Bài viết liên quan