Home
1-luan-an-thac-si
khoa-hoc-tu-nhien-thac-si
Thiết kế vector mang gen HA1 mã hóa protein bề mặt của virus H5N1 và bước đầu chuyển gen HA1 tạo các dòng rễ tơ chuyển gen ở cây thuốc lá
[giaban]0.000 VNĐ[/giaban]
[kythuat]
[/kythuat]
[tomtat]
[tomtat]
Thiết
kế vector mang gen HA1 mã hóa protein bề mặt của virus H5N1 và bước đầu chuyển
gen HA1 tạo các dòng rễ tơ chuyển gen ở cây thuốc lá
MỤC
LỤC
MỞ
ĐẦU
CHƯƠNG
1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1.
Cúm A/H5N1
1.1.1.
Cấu tạo
1.1.2.
Độc lực và tính thích ứng vật chủ
1.1.3.
Khả năng gây bệnh của virus cúm A/H5N1
1.1.4.
Cơ chế xâm nhiễm gây bệnh của virus cúm A trong tế bào vật chủ
1.2.
Kháng nguyên HA
1.3.
Tình hình nghiên cứu cúm A và vấn đề nghiên cứu vaccine cúm A/H5N1 ở Việt Nam
và trên thế giới
1.3.1.
Tình hình nghiên cứu cúm A/H5N1 ở Việt Nam và trên thế giới..
1.3.2.
Nghiên cứu phát triển vaccine cúm A/H5N1 ở Việt Nam và trên thế giới
1.4.
Kỹ thuật chuyển gen thông qua A.rhizogens và ứng dụng
1.4.1.
Giới thiệu vi khuẩn A.rhizogens
1.4.2.
Hệ vector nhị thể
1.4.3.
Ứng dụng nuôi cấy rễ tơ trong sản xuất dược phẩm sinh học tái tổ hợp
CHƯƠNG
2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1.
Vật liệu, hóa chất và thiết bị
2.1.1.
Vật liệu
2.1.2.
Hóa chất
2.1.3.
Thiết bị
2.2.
Phương pháp nghiên cứu
2.2.1.
Phương pháp nhân đoạn gen HA1bằng kỹ thuật PCR
2.2.2.
Phương pháp ghép nối đoạn gen HA1vào pENTR221/cal
2.2.3.
Biến nạp sản phẩm ghép nối gen vào tế bào khả biến E. coli DH-5α bằng phương
pháp sốc nhiệt
2.2.4.
Tạo vector chuyển gen bằng kỹ thuật Gateway
2.2.5.
Biến nạp vector chuyển gen vào A. rhizogenes ATCC15834
2.2.6.
Chuyển cấu trúc mang gen mã hóa protein vỏ virus vào thuốc lá thông qua vi
khuẩn A. rhizogenes ATCC15834
2.2.7.
Phương pháp đánh giá cây trồng chuyển gen
2.2.8.
Phương pháp xử lý số liệu
CHƯƠNG
3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1.
Kết quả tách dòng gen HA1
3.1.1.
Kết quả PCR nhân đoạn gen HA1
3.1.2.
Kết quả tinh sạch sản phẩm PCR
3.1.3.
Ghép nối đoạn gen HA1 vào vector pENTR/cal
3.2.
Thiết kế vector tái tổ hợp mang gen HA1 bằng kỹ thuật Gateway®
3.2.1.
Tạo vector tái tổ hợp theo phản ứng LR
3.2.2.
Kết quả kiểm tra vector tái tổ hợp bằng phản ứng colony-PCR
3.2.3.
Kết quả kiểm tra vector tái tổ hợp bằng enzyme giới hạn
3.3.
Kết quả biến nạp pK7WG2D/cal/HA1 vào vi khuẩn A.rhizogenes
3.4.
Kiểm tra hệ thống tạo rễ tơ chuyển gen thông qua A.rhizogenes sử dụng gen chỉ
thị Gus
3.5.
Kết quả chuyển gen HA1 vào mảnh lá thông qua A. rhizogens để tạo các dòng rễ tơ
chuyển gen HA1
KẾT
LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
TÀI
LIỆU THAM KHẢO
PHỤ
LỤC
Bài viết liên quan