Nghiên cứu sử dụng gen Coda làm chỉ thị chọn lọc tạo vector chuyển gen mang tính an toàn sinh học |Tài liệu miễn phí

Home 1-luan-an-thac-si khoa-hoc-tu-nhien-thac-si Nghiên cứu sử dụng gen Coda làm chỉ thị chọn lọc tạo vector chuyển gen mang tính an toàn sinh học

[giaban]0.000 VNĐ[/giaban] [kythuat]

[/kythuat]
[tomtat]

Nghiên cứu sử dụng gen Coda làm chỉ thị chọn lọc tạo vector chuyển gen mang tính an toàn sinh học

Down tại đây or Down tại đây or Down tại đây

MỤC LỤC

MỞ ĐẦU

CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1. Ảnh hưởng của một số điều kiện bất lợi của môi trường tới thực vật

1.1.1. Sự ảnh hưởng của nhiệt độ cao đến thực vật

1.1.2. Sự ảnh hưởng của hạn hán tới thực vật

1.1.3. Sự ảnh hưởng của đất nhiễm mặn tới thực vật

1.2. Cơ chế chống chịu của thực vật với các điều kiện bất lợi của môi trường

1.2.1. Hệ thống vetor liên hợp

1.2.2. Vetor nhị thể

1.3. Các gen sử dụng trong chọn lọc và chỉ thị

1.3.1. Gen kháng kháng sinh

1.3.2. Gen kháng chất diệt cỏ

1.3.3.Gen chọn lọc mannose

1.3.4.Các gen chỉ thị: GFP (green fluorescene protein), GUS (β-1,4-glucuronidase)

1.4. 1.4. Tổng quan nghiên cứu về vector chuyển gen mang tính an toàn sinh học

1.4.1. Sự cần thiết nghiên cứu vector chuyển gen mang tính an toàn sinh học

1.4.2. Các gen/hệ thống chọn lọc thân thiện

1.4.3. Sự loại bỏ các gen chỉ thị chọn lọc từ cây chuyển gen

1.5.Cơ sở khoa học trong sử dụng gen codA làm chỉ thị chọn lọc ở thực vật chuyển gen

1.5.1. Giới thiệu về gen codA

1.5.2. Các nghiên cứu chuyển gen codA nhằm tăng cường khả năng chống chịu ở thực vật

CHƯƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1. Vật liệu nghiên cứu

2.1.1. Vật liệu thực vật

2.1.2. Các chủng vi khuẩn, vector và cặp mồi sử dụng

2.1.3. Hóa chất, thiết bị

2.1.3.1. Hóa chất

2.1.3.2. Thiết bị và dụng cụ thí nghiệm.

2.2. Phương pháp nghiên cứu

2.2.1. Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction)

2.2.2. Phương pháp điện di DNA trên gel agarose

2.2.3. Phương pháp tinh sạch DNA từ gel agarose

2.2.4. Phương pháp xử lý ADN bằng enzyme hạn chế.

2.2.5. Phản ứng nối ghép gen

2.2.6. Phương pháp biến nạp vector tái tổ hợp vào tế bào khả biến E.coli

2.2.7. Phương pháp tách chiết plasmid tái tổ hợp

2.2.8. Phương pháp biến nạp vector tái tổ hợp vào tế bào khả biến A.tumefaciens C58/PGV2260 bằng xung điện

2.2.9. Phương pháp tạo cây thuốc lá chuyển gen

2.2.10. Kiểm tra sự biểu hiện của gen chuyển ở mức độ phiên mã bằng kỹ thuật RT-PCR

2.2.11. Đánh giá khả năng chịu nhiệt của các dòng thuốc lá K326 chuyển gen codA

2.2.12. Sàng lọc khả năng chịu mặn của dòng thuốc lá chuyển gen in vitro

2.2.13. Phương pháp tính toán và xử lý số liệu

CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3.1. Thiết kế vector chuyển gen pCAMBIA1301/HSP-codA mang gen codA

3.1.1. Thiết kế vector chuyển gen pCAMBIA1301/35S-codA mang gen codA hoạt động dưới sự điều khiển của promoter cơ định 35S

3.1.2.Thiết kế vector pCAMBIA1301/HSP-codA mang gen codA hoạt động dưới sự điều khiển của promoter HSP 18.2

3.1.3.Loại bỏ gen chọn lọc hptII mã hóa cho hygromycin phosphotransferase khỏi vector pCAMBIA1301/HSP-codA

3.1.4.Tạo chủng Agrobacterium tumefaciens mang vector chuyển gen

3.2 . Kết quả chuyển gen codA vào cây thuốc lá K326

3.2.1.Chuyển cấu trúc pCAMBIA1301/HSP-codA vào cây thuốc lá thông qua vi khuẩn A. tumefaciens

3.2.2.Sàng lọc khả năng chịu nhiệt của dòng thuốc lá chuyển gen trong in vitro

3.2.3.Phân tích các dòng cây chuyển gen bằng kỹ thuật PCR

3.2.4. Sàng lọc khả năng chịu mặn của dòng thuốc lá chuyển gen trong in vitro

3.2.5. Phân tích cây thuốc lá chuyển gen codA bằng kỹ thuật RT-PCR

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

[/tomtat]

GIỚI THIỆU

GIÚP ĐỠ

ỦNG HỘ CHÚNG TÔI